電泳遷移率變動分析(EMSA)實驗服務

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

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凝膠遷移實驗又稱凝膠阻滯實驗或電泳遷移率實驗（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是目前研究核酸與蛋白質相互作用的一種重要實驗手段，常用于轉錄因子與啟動子相互作用的驗證性實驗。該實驗利用核酸與蛋白結合后，在非變性聚丙烯酰氨凝膠中電泳的遷移速率會明顯降低的原理，通過設計特異性和非特異性的探針，通過孵育與目標蛋白結合，形成探針-蛋白復合體，由于分子量變大，在聚丙烯酰氨凝膠中的電泳遷移速率下降，相比于未結合的探針會出現(xiàn)滯后效應，再通過探針上特殊的標記物性質，通過轉膜、顯色或曝光，探針-蛋白復合體所在的位置便能形成條帶，從而證明核酸與蛋白的相互作用。目前隨著實驗技術的改進，能夠定性和定量的完成實驗。

EMSA的實驗流程和周期

實驗流程	周期	特點
1、樣品的制備	議定	1、可提供原核表達、酵母表達、病毒-昆蟲細胞表達以及哺乳動物細胞表達等多種重組蛋白表達方式； 2、可提供天然樣本目的蛋白富集和純化服務； 3、可提供專用于胞漿和核蛋白的細胞裂解液，作用條件溫和，裂解效率高，蛋白損傷小。
2、探針的合成和制備	1-2周	1、可提供人工合成探針； 2、探針標記：可提供DIG、Biotin、Cy5等多種非同位素標記； 3、可提供Super-Shift EMSA、雙熒光EMSA等多種基于EMSA技術的實驗服務。
3、探針與樣品孵育
4、6.5%非變性聚丙烯酰胺凝膠制備以及電泳
5、轉膜
6、檢測

備注：
  1、所有的實驗項目需遵守相關法律條款；
2、所有樣本都必須不具有傳染性；
3、客戶可以根據(jù)自己的要求，定制個性化的實驗方案。